甲状腺结节检出THADA-IGF2BP3基因融合有何意义？

越来越多的甲状腺细针穿刺（FNA）标本进行分子检测，扩大了识别的基因融合的种类和数量。虽然识别的分子变异的数量正在增加，但术前分子检测结果与表型之间的明确关联尚不清楚。本研究旨在探索THADA-IGF2BP3 融合与 FNA 分类、手术病理诊断和 ThyroSeq 检测到的其他分子变异。回顾了2017年4月至2023年1月期间FNA细胞学诊断为意义不明的非典型细胞/意义不明的滤泡性病变（AUS/FLUS；Bethesda III）或滤泡性肿瘤/可疑滤泡性肿瘤（FN/SFN；Bethesda IV）并进行了ThyroSeqV3检测的甲状腺结节患者。查看了包括患者人口统计学、FNA 诊断、ThyroSeq V3 结果和手术病理结果在内的参数。在 249 例甲状腺结节 FNA 标本中，87例（35%）存在分子变异。64例（74%）细胞学诊断为AUS，23例（26%）为FN。48例检出RAS突变。手术病理显示，17 例（35%）为具有乳头状核特征的非浸润性甲状腺滤泡性肿瘤（NIFTP）， 14 例（29%）为恶性。8 例检出 THADA-IGF2BP3融合，手术病理均显示 NIFTP（100%）。本研究表明，THADA-IGF2BP3 融合与 NIFTP 病例密切相关。总体而言，THADA-IGF2BP3融合似乎是一个预后较好指标，或可作为NIFTP的分子标志物。

研究背景

甲状腺细胞病理Bethesda报告系统（TBSRTC）将甲状腺结节细针穿刺（FNA）分为 6 个不同的类别，包括：无法诊断（I 类）、良性（II 类）、意义不明确的异型性病变（AUS，III 类）、滤泡性肿瘤（FN，IV 类）、可疑恶性肿瘤（SFM，V 类）和恶性（VI 类）。具有乳头状核特征的非浸润性甲状腺滤泡性肿瘤（NIFTP）是 2016 年引入的。NIFTP细胞学表现出弥漫性但轻度的核异型性。NIFTP 的细胞学 TBSRTC 分类通常为具有核异型性的 AUS。从宏观和组织学上看，NIFTP 一种边界清晰或具有包膜的实性结节，没有包膜和血管侵犯。可以看到核异型性，包括轻微的乳头状甲状腺癌样核。诊断必须包括以滤泡生长模式为主。采用由3个核特征组成的评分系统做出NIFTP的诊断。评分系统包括：1.核增大/拉长/重叠/拥挤，2.核膜不规则、核沟、假包涵体，3.染色质淡染。对于每一类核特征，肿瘤的得分为 0 或 1，肿瘤的总分范围为 0 到 3 分。2-3 分是诊断 NIFTP 的必要条件。

对甲状腺细针穿刺（FNA）标本进行分子检测有助于不确定诊断组（Bethesda III组和IV组）患者的管理。ThyroSeq v3 GC 使用高通量靶向 DNA 和 RNA 测序来检测突变和基因融合。该检测对 AUS 和 FN 病例具有很高的阴性预测值（95%）。融合包括甲状腺腺瘤相关（THADA）-IGF2BP3 基因融合。THADA-IGF2BP3 融合被认为是甲状腺肿瘤中的致癌事件。2号染色体和 7 号染色体上的位于 IGF2BP3 基因上游 12 kb 的 LOC389473 基因之间的重现性融合导致全长 IGF2BP3 mRNA 和蛋白质的强烈过表达。PI3K 和 MAPK 级联导致 IGF2 翻译和 IGF1 受体（IGF1R）信号传导增加。这些变化促进细胞增殖、侵袭和转化。IGF2BP3过表达也见于胰腺癌、肺鳞状细胞癌、肺腺癌、胃癌、胆管癌和结直肠癌。

本研究旨在确定甲状腺结节中 THADA-IGF2BP3 融合的相关性，并将结果与 ThyroSeq 检测到的其他分子变异进行比较。

研究结果

对加州大学洛杉矶分校大卫格芬医学院的数据库进行检索，获得 2017 年 4 月至 2023 年 1 月期间 FNA 细胞学诊断为 Bethesda III 和 IV、有 ThyroSeq-V3 结果的甲状腺结节患者列表。回顾了患者人口统计学信息、FNA诊断、ThyroSeq-V3结果和手术病理诊断。ThyroSeq 结果为阴性，进行其他分子检测，或未进行手术病理随访的病例被排除在研究之外。根据手术病理诊断将病例分为三组。I组为良性，II组为NIFTP，III组为恶性。对三组患者的分子变异与组织病理诊断进行比较分析。

2017 年 4 月至 2023 年 1 月期间，有 7521 例甲状腺 FNA，716 例被诊断为 AUS（9%），33 例被诊断为 FN（0.45%）。根据临床医生的要求，所有诊断不确定的病例都进行了ThyroSeq或Afirma分子检测。

识别了 249 例 FNA 细胞学诊断为 AUS 和 FN 的患者，其中87 例 ThyroSeq-V3 检测显示存在分子变异并进行了手术随访。有 71 例女性患者和 16 例男性患者，年龄范围从 19 岁到 80 岁不等。结节大小从0.7到7.0cm不等。

总体而言，64 例（74%）细胞学诊断为 AUS，23 例（26%）为 FN。ThyroSeq V3 检测显示 48 例存在 RAS 突变伴或不伴其他分子变异。其中 17 例（35%）手术病理诊断为良性，17 例（35%）为NIFTP，14 例（29%）为恶性。8例存在孤立性THADA-IGF2BP3融合，手术病理均显示NIFTP（100%）。所有 NIFTP 病例均由头颈部病理专家审核。

在7例患者中观察到BRAF突变伴或不伴基因表达谱（GEP），手术病理诊断均为恶性。在9例患者中观察到拷贝数变异（CNA），手术病理诊断均为良性。其他分子变异（DICER1突变、PAX8:PPARG融合、NTRK3融合、CCDC6、RET、PTEN突变、GEP、EIF1AX和TERT突变）见于15例患者，其中4例（26%）手术病理诊断为良性，11例（73%）为恶性。表1总结了这些结果。

表1

I组（手术病理良性）

该组有30例患者。患者的年龄在23至73岁之间。结节的大小从1.0到4.4cm不等。诊断包括 Hürthle 细胞腺瘤、滤泡腺瘤、腺瘤样结节和慢性淋巴细胞性甲状腺炎。22例细胞学诊断为AUS，8例细胞学诊断为FN。分子检测显示，17例RAS伴或不伴其他分子变异，9例CNA，4例PAX8/PPARG融合和EIF1AX突变。总体而言，RAS突变是良性组最常见的变异（60%），其次是CNA（32%）以及PAX/PPARG融合和EIFX突变（14%）。图1总结了这些发现。

图1

II组（手术病理NIFTP）

该组有25例患者。患者的年龄在19至80岁之间。结节的大小从1.0到5.0cm不等。21例细胞学诊断为AUS，4例细胞学诊断为FN。分子检测显示，17例RAS伴或不伴其他分子变异，8例THADA-IGF2BP3。同样，最常见的变异是RAS突变（68%），其次是THADA-IGF2BP3（32%）。图2总结了这些发现。图 3 展示了一例患者诊断为 AUS，检出THADA-IGF2BP3融合，组织学结果为NIFTP。在本研究结束时，所有患者均未复发。

图2

图3

III组（手术病理恶性）

该组有32例患者。患者的年龄在25至71岁之间。结节的大小从0.7到7.0cm不等。21例细胞学诊断为AUS，11例细胞学诊断为FN。组织学诊断包括 27 例乳头状甲状腺癌、4 例滤泡癌和 1 例 Hürthle 细胞癌。乳头状甲状腺癌患者的分子检测结果显示，14例RAS伴或不伴其他分子变异，7例BRAF+基因表达谱（GEP），1例DICER，1例NTRK3融合，1例GEP，1例CCDC6，1例TYERT+PIK3CA。滤泡癌患者ThyroSeq V3检测结果显示，1例NRAS突变，1例NRAS+TERT突变，1例HRAS+TERT突变+GEP，1例PTEN突变+CNA。Hürthle细胞癌病例存在EIFX+TERT突变。总体而言，RAS突变是最常见的分子变异（53%），其次是BRAF（32%）。图4总结了这些发现。

图4

 讨 论 

本研究旨在比较 ThyroSeq 在 NIFTP 病例中检测到的分子变异结果。RAS 突变是 NIFTP 中最常见的变异（68%），RAS 突变存在于 60% 的良性甲状腺病变和 53% 的恶性病例。THADA-IGF2BP3融合是唯一的只存在于NIFTP，不存在于其他病变的分子变异。

我们识别了六篇将甲状腺 FNA 中的 THADA 融合与手术病理结果相关联的研究，将我们的研究结果与其进行比较。表2总结了这些研究。

表2

NIFTP中最常见的分子变异是RAS家族变异。60% 的 NIFTP 病例携带 RAS 变异，其次是 PAX8:PPARG（30%）和 THADA 基因融合（30%）。BRAF K601E、EIF1AX、EZH1、DICER1、PTEN 或 TSHR 突变在 NIFTP 中较少见（10%）。未在 NIFTP 中发现 BRAF V600E 突变和 RET 融合。

总体而言，我们的研究结果与其他研究结果一致，支持THADA-IGF2BP3融合提示低风险行为。在0%-45%的NIFTP病例和0%-100%的乳头状甲状腺癌病例中观察到THADA融合。虽然Goldner等人关于THADA融合也得出了类似的结果，但他们基于PubMed搜索，对AUS和FN的所有分子亚型进行了荟萃分析。因此，我们没有将这项研究纳入表2。在Abdelhakam等人的研究中，一例患者携带THADA融合，随访结果为乳头状甲状腺癌。在Roberts等人的研究中，3例患者手术结果恶性，这些患者携带THADA融合，包括2例THADA:IGF2BP3融合和1例THADA:TRA2A融合。THADA:IGF2BP3和THADA:TRA2A融合之间的预期行为的比较没有得到很好的描述，可能需要进一步研究。

Panebianco等人研究了甲状腺癌中THADA融合作为IGF2BP3激活和IGF1R信号传导的机制，发现THADA融合和IGF2BP3过表达存在于5%的甲状腺癌，这些甲状腺癌没有其他驱动突变。他们报告 5 例 NIFTP 或滤泡亚型PTC存在IGF2BP3过表达。由于他们没有说明 NIFTP vs 滤泡亚型PTC的确切数量，因此我们没有将其包含在表 2 中。Tali 等人的研究显示，在 7 例 THADA-IGF2BP3融合病例中，2 例为 NIFTP，另外 5 例为滤泡亚型PTC。总的来说，他们表明THADA-IGF2BP3融合具有更惰性的行为。在本研究中，所有THADA融合病例也没有复发。

虽然这些不同研究的结果存在轻微差异，可能由NIFTP诊断中的观察者间差异引起，但Thompson等人指出，诊断NIFTP的病理专家之间的一致性较高。

本研究结果强调了分子检测的重要性，为甲状腺病变的临床和手术管理铺平道路方面。在我们的患者中，在 NIFTP 病例中观察到 THADA-IGF2BP3 融合，可能为该实体新的特异性基因变异。总的来说，THADA-IGF2BP3融合似乎是甲状腺肿瘤的预后较好分子标志物。需要进行更大规模的多中心研究，进一步评估 THADA-IGF2BP3 融合（有或无其他分子标志物）与组织病理学结果的相关性。

参考文献：

Zand A, Kim TH, Rodriguez EF, Moatamed NA. THADA-IGF2BP3 gene fusions in thyroid fine needle aspiration is involved in the pathway to "noninvasive follicular thyroid neoplasm with papillary-like nuclear features". Diagn Cytopathol. 2024 Jun 15. doi: 10.1002/dc.25373. Epub ahead of print. PMID: 38877784.