Biochem Biophys Res Commun:从小鼠干细胞产生表达视紫红质和S-和M-视锥视蛋白的三维视网膜类器官!
2017-12-24 cuiguizhong MedSci原创
日本兵库县神户市神户市发育生物学研究中心视网膜再生实验室的Ueda K 近日在Biochem Biophys Res Commun发表了他们团队的重要工作,他们改进快速聚集(SFEBq)过程,从小鼠干细胞进行定向分化,得到了表达更多杆状感光体和S-视锥和M-视锥视蛋白的视网膜类器官。
日本兵库县神户市神户市发育生物学研究中心视网膜再生实验室的Ueda K 近日在Biochem Biophys Res Commun发表了他们团队的重要工作,他们改进快速聚集(SFEBq)过程,从小鼠干细胞进行定向分化,得到了表达更多杆状感光体和S-视锥和M-视锥视蛋白的视网膜类器官。
在特定的培养基条件下,三维视网膜类器官可以从胚胎干细胞或诱导多能干细胞(ES / iPS细胞)进行定向分化得到。在类胚体样聚集体的无血清悬浮培养过程中,他们改进快速聚集(SFEBq)过程,获得表达更多杆状感光体和S-视锥和M-视锥视蛋白的视网膜类器官。
根据光感受器发育过程,将小鼠Nrl-eGFP iPS细胞培养在各种培养基中,以分化得到视网膜类器官。为了促进杆状感光器的发育,将类器官在含有9-顺式视黄酸(9cRA)的培养基中进行培养。为了获得具有M-视蛋白表达的视网膜类器官,他们在含有T3、BMP4和DAPT的1%胎牛血清(FBS)的培养基中进行培养。通过切片免疫组织化学的方法来检测光感受器标记物的表达。
分析结果发现,在含有9-顺式视黄酸(9cRA)的培养基中培养的三维(3D)视网膜类器官中,早期表达视紫红质并抑制S锥视蛋白的表达。在含1%FBS的培养基中,三维视网膜类器官可以维持达到DD 35阶段。三维视网膜类器官表达视紫红质、S-和M-视蛋白,但大多数锥形感光细胞表达S-或M-视蛋白。
因此,他们认为,通过改进快速聚集(SFEBq)过程中的培养条件,他们获得了以视杆细胞为主的三维视网膜类器官,并且在三维视网膜类器官中表达S-视蛋白和M-视蛋白。
原文出处:
Ueda, K., et al., Generation of three-dimensional retinal organoids expressing rhodopsin and S- and M-cone opsins from mouse stem cells. Biochem Biophys Res Commun, 2017.
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