CCLM:miRNA在检验医学中的应用—检测循环和组织miRNA中变量控制的更佳操作建议

2017-04-23 MedSci MedSci原创

微小RNA(miRNA)可以作为各种疾病进程和确定细胞分化的生物标志物,并且在此方面表现极具前景。这些短序列RNA分子丰度高,能够承受严酷的处理条件和储存条件,并且可以从血液和组织中提取。

近日,国际杂志Clinical Chemistry and Laboratory Medicine上在线发表一期专辑介绍关于miRNA在检验医学中的应用的研究,阐述了miRNA在疾病病因学,诊断以及治疗中的作用和应用前景。

微小RNAmiRNA)可以作为各种疾病进程和确定细胞分化的生物标志物,并且在此方面表现极具前景。这些短序列RNA分子丰度高,能够承受严酷的处理条件和储存条件,并且可以从血液和组织中提取。

预分析变量是miRNA分析中的关键混杂因素,研究人员在此将阐明这些变量,并确定最小化血液和组织标本样本差异的最佳手段。预分析变量包括患者固有差异,从样本收集到储存或处理的时间和温度,处理方法,细胞和血液成分的污染,RNA提取方法,归一化和储存时间/条件。对于循环miRNA,溶血和血细胞污染显著影响miRNA资料,样品应在收集后2 h内进行处理,应该优先选择乙二胺四乙酸(EDTA)是优选的,而避免肝素的使用。 样品应“双纺”或过滤; 最好在室温或4℃储存24小时以内。 miRNA-20°C-80°C下可稳定保存至少1年。对于组织样本的分析,热缺血时间应<1 h,冷缺血时间(4℃)<24小时;常用固定剂可用于所有标本,处理前福尔马林固定72h,富集目标细胞;验证具有原位可视化的候选生物标志物。最重要的是,所有标本类型应具有标准和通用的工作流程,并仔细记录相关的前期分析变量。

原始出处:

Khan, Jenna, Lieberman, Joshua A, Lockwood, Christina M. Variability in, variability out: best practice recommendations to standardize pre-analytical variables in the detection of circulating and tissue microRNAs. CCLM. 2017

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