J Periodontol:信号调节蛋白激酶/蛋白激酶B-p53-BH3–结构域凋亡诱导蛋白通路调节成骨细胞牙龈素诱导的细胞凋亡

2017-11-12 MedSci MedSci原创

牙龈素是由牙龈卟啉单胞菌(慢性牙周炎中的主要病原体)产生的半胱氨酸蛋白酶。本研究旨在检测牙龈素在促进成骨细胞凋亡中的作用。

牙龈素是由牙龈卟啉单胞菌(慢性牙周炎中的主要病原体)产生的半胱氨酸蛋白酶。本研究旨在检测牙龈素在促进成骨细胞凋亡中的作用。

方法:用8.348U / L牙龈素处理人颅骨成骨细胞和成骨细胞MC3T3-E1细胞。流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧-UTP缺口末端标记染色检测细胞凋亡。通过蛋白质印迹检测蛋白质表达,通过实时聚合酶链式反应检测基因表达。使用小干扰(si)RNA转染来敲掉BH3-结构域凋亡诱导蛋白(Bid)表达。

结果:8.348U / L牙龈素处理4-72小时后增加细胞凋亡,伴随着切割的半胱天冬酶-3水平的升高。值得注意的是,牙龈素诱导的细胞凋亡与Bid和其截短形式tBid以及p53的增加有关。用Bid siRNA转染抑制了黄芩苷诱导的细胞凋亡。 p53抑制剂,Pifithrin-α阻断了牙龈素诱导的Bid。分别用特异性细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(PKB)抑制剂PD-0325901和MK-2206模拟牙龈素刺激p53和Bid表达的能力。此外,用牙龈素治疗降低phospho-ERK和phospho-PKB的水平,这与牙龈素诱导p53和tBid表达增加相关。

结论:目前的研究结果表明,Bid在牙龈素诱导的成骨细胞凋亡中起着重要的作用,其依赖于ERK和PKB磷酸化的抑制和p53的活化。

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