PLos One:骨关节炎硬化性与非硬化软骨下骨中成骨细胞分泌蛋白质组的比较

2018-03-19 xiangting MedSci原创

这些发现提示骨调节蛋白和fibulin-3片段可作为监测骨关节炎软骨下骨代谢早期变化的生物标志物。

骨关节炎(OA)以软骨退化为特征,但也可表现为其他关节组织改变如软骨下骨硬化。在这项研究中,研究人员使用蛋白质组学方法比较了从OA软骨下骨的硬化(SC)或非硬化(NSC)区域分离的成骨细胞的分泌蛋白质组。

使用差分定量和相对无标记分析在nanoUPLC G2 HDMS系统上分析了分泌蛋白质组。通过RT-PCR从5名其他患者的细胞培养物中量化更差异分泌的蛋白质mRNA。最后,通过蛋白质印迹和免疫测定法在血清和培养上清液中定量骨调节蛋白和fibulin-3序列。

在NSC成骨细胞分泌组中发现了175种蛋白质。数据可通过ProteomeXchange以标识符PXD008494获得。与NSC成骨细胞分泌组相比,SC成骨细胞12种蛋白质分泌少(骨调节蛋白,IGFBP5,VCAM-1,IGF2,78kDa葡萄糖调节蛋白,多能聚糖,网腔钙结合蛋白,IGFBP2,血小板反应蛋白-4,骨膜蛋白,网状钙粘蛋白1和骨连接素),13种蛋白质分泌多(CHI3L1,fibulin-3,SERPINE2,IGFBP6,SH3BGRL3,SERPINE1,网状血管蛋白3,α-2-HS-糖蛋白,TIMP-2,IGFBP3,TIMP-1,SERPINF1,CSF-1)。骨调节素,IGF2,SERPINE1,fibulin-3和CHI3L1 的mRNA水平有类似变化。ELISAs测定证实了SC成骨细胞上清液中骨调蛋白与NSC相比降低了一半,OA患者血清与健康受试者相比也降低一半。

这项研究重点介绍了OA软骨下骨硬化成骨细胞中一些蛋白质的差异性分泌。这些变化有助于解释在OA软骨下骨观察到的一些特征,如骨重塑的增加或骨基质矿化的异常。在识别的蛋白质中,OA患者血清中,骨调节蛋白降低而fibulin-3升高。这些发现提示骨调节蛋白和fibulin-3片段可作为监测骨关节炎软骨下骨代谢早期变化的生物标志物。

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